Meilleures pratiques pour la validation des désinfectants dans les salles blanches 

Les désinfectants utilisés dans les salles blanches des industries pharmaceutique, biotechnologique et des dispositifs médicaux doivent être validés pour l’utilisation prévue. Il s’agit d’une attente réglementaire pour garantir l’utilisation d’un désinfectant approprié et le maintien d’un contrôle microbiologique dans l’environnement. Le test d’efficacité du désinfectant est l’un des volets de la validation, dans le cadre duquel le désinfectant est testé en laboratoire en termes d’efficacité antimicrobienne. Le Conseil technique suivant fournit des recommandations sur les meilleures pratiques pour les tests d’efficacité des désinfectants en laboratoire.

Attentes générales

La dilution d’utilisation, le temps de contact et la température d’exposition du désinfectant évalué dans le cadre de l’étude doivent correspondre aux conditions d’utilisation réelles et prévues du désinfectant dans la zone classée.

Il est essentiel, d’un point de vue réglementaire, d’évaluer les isolats du site à partir du suivi environnemental. Sélectionnez les isolats à utiliser dans le test d’efficacité du désinfectant après avoir établi les conditions de suivi environnemental de base.  

Les facteurs à prendre en compte pour cela sont :

• la fréquence d’apparition ;
• la difficulté anticipée ou démontrée à désinfecter (par exemple, Bacillus cereus) ;
• l’apparition en grand nombre lors de la récupération.

Éprouvettes

Travaillez avec les fabricants de surfaces pour salles blanches pour obtenir des éprouvettes représentatives des matériaux de surface des zones classées. Les surfaces avec des spécifications bien définies (par exemple, acier inoxydable 304 ou 316L) peuvent être achetées à partir d’options d’approvisionnement générales.

L’état de l’éprouvette peut avoir un impact significatif sur les tests d’efficacité du désinfectant. Les éprouvettes doivent :

• ne pas présenter de rouille ou de piqûres non représentatives des surfaces des zones classées ;
• être plates ;
• ne pas reposer sur un support absorbant, pelucheux ou sujet à des pertes.

Évaluez les éprouvettes du matériau de surface pour connaître la tolérance à la chaleur, en cas de traitement dans un stérilisateur à chaleur humide. Une décontamination chimique avec un sporicide, tel que stérilisant Spor-Klenz® RTU, peut également être utilisée. Un traitement incorrect des éprouvettes peut avoir un impact négatif sur les tests.

Micro-organismes

Augmentez la probabilité de viabilité des cultures bactériennes végétatives viables :

• incubant les cultures pendant 18 à 24 heures, pour la plupart des bactéries végétatives ;
• utilisant les suspensions dans les 2 heures si elles sont conservées à température ambiante ou dans les 24 heures si elles sont conservées au réfrigérateur ;
• utilisant la courbe d’un spectrophotomètre pour estimer les niveaux d’unités formant colonies (UFC) en suspension plutôt que d’attendre les résultats de la population.

Veillez à ce que la concentration de la suspension d’inoculum soit suffisante pour démontrer la réduction requise de 10 logs. Tenez compte de la limite de détection de la méthode de récupération et de la perte potentielle de cellules viables, due à la mortalité par dessiccation. Des études préliminaires de séchage d’espèces problématiques, telles que Pseudomonas aeruginosa et Candida albicans, peuvent éviter d’avoir à répéter les tests liés à la faible récupération.

Si vous travaillez avec une suspension de spores fongiques (conidies), une filtration de la suspension de spores est nécessaire pour éliminer les fragments de mycélium. La filtration peut être réalisée en utilisant divers matériaux de filtration, tels que de la laine de verre stérile ou un filtre fritté. La présence de fragments de mycélium ou d’hyphes peut protéger les spores fongiques du contact avec le désinfectant ou le sporicide.

Veillez à ce que des critères d’acceptation de réduction 10 logs appropriés soient utilisés pour évaluer l’efficacité des désinfectants. L’USP <1072> Disinfectants and Antiseptics exige :

• une réduction de 3 log 10 des bactéries végétatives ; et
• une réduction de 2 log 10 des spores bactériennes.

Ces critères d’acceptation sont appropriés pour les tests d’efficacité des désinfectants dans un environnement de fabrication aseptique.

Procédure de laboratoire

Si l’on stocke une dilution d’usage d’un désinfectant concentré (par exemple, dans un réservoir de rétention ou un flacon pulvérisateur), les autorités de réglementation s’attendent à disposer de données soutenant la date de péremption de la dilution d’usage définie en interne.

Faites preuve d’une extrême prudence pour éviter de déposer des organismes en dehors de la zone d’exposition prévue du produit de test. Il suffit que seulement 0,01 µL d’inoculum ne soit pas exposé au produit à tester pour entraîner l’échec du test.

Une validation de la neutralisation doit être effectuée pour qualifier un temps de contact distinct. Les normes USP <1227> Validation of Microbial Recovery from Pharmacopeial Items, USP <61> Microbial Examination of Nonsterile Products: Microbial Enumeration Test et EN 13697, Antiseptiques et désinfectants chimiques, fournissent des plans d’étude potentiels pour la validation de la neutralisation. Vous trouverez ci-dessous une liste des neutralisants chimiques courants pour des ingrédients actifs spécifiques. 

TABLEAU 1. Neutralisants chimiques d’ingrédients actifs désinfectants courants 

Évaluez les milieux de culture et les conditions d’incubation appropriés pour chaque organisme avant le début de l’étude.

La récupération par immersion des éprouvettes est généralement la méthode de récupération la plus efficace. Les normes ASTM E2197 Standard Quantitative Disk Carrier Test Method et EN 13697 Antiseptiques et désinfectants chimiques fournissent des méthodes potentielles de récupération par immersion. La taille de l’éprouvette de surface peut avoir un impact significatif sur la méthode de récupération. L’adéquation des méthodes de récupération doit être évalué à l’aide d’éprouvettes de surface d’étude spécifiques. 

Ressources supplémentaires : 

• USP <1072> Disinfectants and Antiseptics
• PDA TR 70 Fundamentals of Cleaning and Disinfection Programs for Aseptic Manufacturing Facilities
• EN 13697 Désinfectants chimiques et antiseptiques.
• ASTM E2197 Standard Quantitative Disk Carrier Test Method
• ASTM E2614 Standard Guide for Evaluation of Cleanroom Disinfectants